آموزش وردپرس
خانه / گزارش کار / قارچ شناسی پزشکی ( گزارش کار ) / ادامه بحث “روش تهیه کشت روی لام در مورد قارچ های رشته ای (Slide culture)”

ادامه بحث “روش تهیه کشت روی لام در مورد قارچ های رشته ای (Slide culture)”

(این مطالب ادامه بحث قبل در مورد Slide culture  می باشد. )

دو روش برای تهیه کشت روی لام وجود دارد : 1)نمونه تهیه شده از لامل      2)نمونه تهیه شده از لام

مونته کردن این دو نمونه هم به صورت دائمی و هم به صورت موقت انجام می گیرد. (مانت :لام و لامل و هرچه زیر لامل است مثلا اگر زیر لامل KOH باشد می شود KOH مانت یا لاکتوفنل مانت….)

مواقعی که تمایل داریم لام تهیه شده را برای مدت طولانی نگهداری کنیم , مونته دائم انجام می دهیم. در این بحث لامل را با مونته موقت و لام را با مونته دائمی انجام می دهیم.

1)نمونه تهیه شده از لامل با مونته موقت :(در تمامی مراحل ابزار ها را قبل از استفاده توسط شعله استریل می کنیم)

a) استفاده از ماده ضدعفونی کننده بر روی کاغذ کار و روشن کردن شعله

b)حصول اطمینان از رشد خوب محیط کشت (کلنی ها تا لبه های لامل رشد کند.)

c)لام را از داخل Plate در می آوریم. اگر زیر لام خیس بود , خشک می کنیم.

لام قارچ

d)یک لام تمیز را از روی شعله عبور می دهیم.

e)برای مونته موقت از لاکتوفنل لایت گرین استفاده می کنیم و یک قطره روی لام میریزیم.

مانته موقت

f)با یک پنس ظریف لامل داخل Plate را برمیداریم و روی لاکتوفنل قرار می دهیم.مطمئن شویم لامل با دقت روی لاکتوفنل قرار گیرد. اگر محیط کشت با لامل چسبیده بود از آن جدایش می کنیم.

لام مانته موقت

g)محیط کشت روی لام داخل Plate را با اسکالپر داخل Plate می اندازیم یا اوت می کنیم. سپس اسکالپر را روی شعله میگیریم.

h)اطراف لام مونته موقت را تمیز می کنیم که رنگ اضافه نداشته باشد سپس روی شعله میگیریم که اگر حبابی تشکیل شده خارج شود.

رفع حباب

i)سپس زیر میکروسکوپ نگاه می کنیم. در انتها به کمک لاک بی رنگ ، لامل را روی لام محکم می کنیم.

چسب

با بزرگنمایی 10*10 هایف ها را می بینیم.

با بزرگنمایی 10*40 موارد زیر را تشخیص می دهیم:

  • Coenocytic هایف بدون تیغه
  • Hyalohyphomycete  هایف سبز لاکتوفنل با تیغه میانی
  • Phaeohyphomycete  هایف قهوه ای با تیغه میانی

دوباره با بزرگنمایی 10*10 به دنبال دستگاه اسپورزایی می گردیم.

سپس با بزرگنمایی 10*40 conidia میبینیم که می تواند شامل کروولاریا, فوزاریوم(موزی شکل) , اسکوپولاریوپسیس(لیمویی) , گرد و تیره و خاردار (در ASP.niger) باشد و یا ممکن است شکل مشخصی نداشته باشند.

2)نمونه تهیه شده از لام با مونته دائم:

a) از لام داخل Plate که محیط کشت را از روی آن برداشتیم برای مونته دائم استفاده می کنیم. با قلم الماس روی آن نشانه گذاری می کنیم.

b)از محلول لاکتوفنل آنیلین بلو غلیظ که سرطان زا نیست روی تمام قسمت های لام که قارچ رشد کرده بود, میریزیم و 15 دقیقه صبر می کیم و سپس :

غلیظ

 

  1. شستشو در اتانول 70 درصد به سرعت
  2. شستشو در اتانول 95 درصد به مدت 10 دقیقه
  3. شستشو در الکل مطلق یا استون به مدت 10 دقیقه
  4. شستشو در استن_گزیلن به مدت 10 دقیقه
  5. افزودن سریع گزیلن
  6. بلافاصله ماده مونته کننده(چسب) و لامل را بر آن قرار می دهیم.نباید گزیلن خشک شود. باید سریع چسب ریخته شود.

 

نمونه اسلاید های قارچ شناسی پزشکی :

 

 

 

Alternalia

آلترنالیا

قارچ آلترنالیا

Rhizopous

 

 

 

ریزوپوس

ریزوئید

رایزوئید

syncephalastrumپنی سیلیوم

کونیدیوفور

10 like
Print Friendly, PDF & Email

درباره ی پریسا ملکوتی

5
سوال یا نظری دارید؟ بنوبسید

avatar
3 Comment threads
2 Thread replies
0 Followers
 
Most reacted comment
Hottest comment thread
4 Comment authors
مریمپریسا ملکوتیمهدیس مختارسجّاد علیا Recent comment authors
  Subscribe  
newest oldest most voted
Notify of
مریم
Guest
مریم

بسیار عالی ممنون من که خیلی استفاده کردم

مهدیس مختار
Member

برای شروع خوب بود.
ممنون.

سجّاد علیا
Member

خیلی دقیق و کامل.تبریک بابت شروع فعالیتتون.موفق باشید