آموزش وردپرس

رنگ آمیزی گرم

(( رنگ‌آمیزی گرم (به انگلیسی: Gram staining) یکی از مهم‌ترین و متداولترین روش‌های رنگ‌آمیزی در میکروبیولوژی است که اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. دراین رنگ آمیزی باکتری‌ها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت و گرم منفیتقسیم می‌شوند. رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد.دررنگ آمیزی گرم باکتری‌های گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری‌های گرم منفی به رنگ قرمز مشاهده می‌شود.

گرچه هر دو گروه یعنی باکتری‌های گرم مثبت و منفی دارای دیواره می‌باشند ولی فرق بین این دو گروه مربوط به خواصی است که در ساختمان دیواره سلولی آنها وجود دارد. اساس ساختمان در دیواره سلولی باکتری‌های گرم مثبت لایه ی ضخیمی‌از پپتیدوگلیکان است

، ولی در باکتری‌های گرم منفی ضخامت آن به حداقل می‌رسد. )) (ویکی پدیا)

اولین قدم تهیّه گسترش مناسب است پس  اوّل یک قطره سرم فیزیولوژی را روی یک لام بریزید

4b039ba7-e058-4345-bf9b-b34807e1ee09

یادتان باشد که باید در سطح لام یک علامت حک کنید تا بعدا از روی آن تشخیص بدهید که کدام قسمت روی لام است و کدام قسمت پشت لام ( بر اساس تجربه )

حالا نوبت انتقال تعدادی باکتری به سطح لام است ،  وسیله مورد استفاده برای برداشت باکتری از محیط کشت و انتقال آن به لام ، لوپ  نام دارد که در تصویر می بینید ، قبل از اقدام به انتقال ، لازم است لوپ را روی شعله مدت زمانی نگه دارید تا پاکسازی شود.

9a6691ac-7a76-4562-ba72-745e7381d347

پس درب plate را در محیطی نزدیک شعله باز کنید ، این مرحله از نظر رعایت بهداشت بسیار مهم است ، راه های ورود باکتری به بدنتان را به شدت کنترل کنید و به هیچ عنوان  محیط را استشمام نکنید

لوپ را با محتویات plate تماس دهید  تا به باکتری آغشته شود.

سپس انتهای آغشته به باکتری لوپ را روی لام در سرم فیزیولوژی فرو ببرید و آن را حرکت دهید تا یک گستره مناسب در سطح لام ایجاد شود

537ad87a-17f7-404f-8934-6d3fae783463

حال باید به گسترش تهیه شده  چند دقیقه فرصت داد تا خشک شود.

بعد از خشک شدن ، نوبت فیکس کردن گسترش است ، به این منظور ، لام را سه مرتبه از درون شعله رد کنید ( ترجیحا از ناحیه 2 شعله )

606d28cd-a3cf-4bd8-a26a-9545bdff3bdc

تردد باید به اندازه ای باشد که دمای لام خیلی بالا نرود ، یعنی دست را نسوزاند.

این عمل از طریق مکانیسم دناتوره کردن پروتئین های باکتری ها باعث فیکس شدن گستره می شود.

حالا نوبت رنگ آمیزی است ، رنگی که باکتری های گرم مثبت با آن شناخته می شوند ،  ((کریستال ویوله)) با ظاهری بنفش    و رنگی که  باکتری های گرم منفی با آن شناخته می شوند رنگ (( فوشینگ )) یا (( سافرانین ))با ظاهری صورتی است.

ابتدا با کمک یک پیپت مقداری کریستال ویوله برداشته و بصورت زیر روی لام گستره مورد نظر می ریزیم تا تمام سطح گستره را بپوشاند

پس از یک دقیقه ، سطح لام را با آب می شوییم

d3374af5-8292-4fae-ac05-8a4d3d65c613

حالا باید سطح لام را به (( ید یا همان لوگول )) آغشته کنیم . این کار سبب تثبیت رنگ متصل شده به باکتری گرم مثبت می شود. (تصویر سمت راست)

سپس سطح لام را با الکل می شوییم  (تصویر سمت چپ)، الکل باید 30 ثانیه روی گستره بماند . سپس با آب سطح لام را می شوییم.

994c40a5-48a4-469f-9fea-4d48dcf97091

هنگام استفاده از کریستال ویوله ، همه باکتری ها ، چه گرم مثبت و چه گرم منفی رنگ گرفته بودند ، اما با انجام مراحل فوق ، رنگ فقط بر روی باکتری های گرم مثبت می ماند و باکتری های گرم منفی رنگ را از دست می دهند ، پس در پایان این مرحله ، گرم مثبت ها دیده می شوند.

حالا نوبت مشخص کردن باکتری های گرم منفی است ، پس روی گستره ، سافرانین می ریزیم و یک دقیقه زمان می دهیم تا بماند و بعد با آب می شوییم و صبر می کنیم تا خشک شود و نهایتا لام را برای مطالعه زیر میکروسکوپ می گذاریم.

770abe53-d0f8-4797-b36c-7a775f894209

در زیر میکروسکوپ ، باکتری های گرم مثبت به رنگ بنفش و باکتری های گرم منفی به رنگ صورتی دیده می شوند.

اگر نیاز به کسب اطاعات بیشتری دارید ، لینک زیر را پیشنهاد می کنیم

ویکی پدیا

با احترام / امیر اکبری

توجه : این نوشته ممکن است دارای نواقص علمی و یا نوشتاری باشد ، لذا نویسنده با تاکید بر این نکته ، هیچ مسئولیتی در ارتباط با اعتبار این مطلب ندارد.

2 like
Print Friendly, PDF & Email

درباره ی امیراکبری

سوابق مرتبط: عضو باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان دانشگاه آزاد اسلامی ( و همچنین عضو افتخاری این باشگاه) عضو شورای ناظر بر نشریات دانشگاهی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران صاحب امتیاز، مدیر مسئول و سردبیر نشریه دانشگاهی علوم آزمایشگاهی پزشکی و بالینی ( 94-95) مدیر مسئول نشریه علمی علوم پزشکی "جست و جوی سلامت" ( 95 تا کنون ) موسس و مدیر گروه علوم آزمایشگاهی پزشکی و بالینی (گروهی مستقل علمی متشکل از دانشجویان علوم پزشکی ) موسس و مدیر سایت علمی آموزشی پزشکی و سلامت MACLS (Mediclal And Clinical Laboratory Science) دانشجوی ممتاز علوم آزمایشگاهی تشخیص طبی (خبرگزاری نیویدار ) دانشجوی برتر حوزه علوم پزشکی ( خبرگزاری ایسنا ) کسب کننده عنوان نفر اوّل رشته واحد پزشکی تهران (خبرگزاری آنا ) نویسنده سری مقالات علمی و آموزشی علوم پزشکی در نشریات علمی تقدیر شده به عنوان مدیرمسئول نشریه برگزیده کشور در شاخه علوم پزشکی (خبر گزاری آنا)

3
سوال یا نظری دارید؟ بنوبسید

avatar
3 Comment threads
0 Thread replies
0 Followers
 
Most reacted comment
Hottest comment thread
3 Comment authors
mujeres sexysbest eye wrinkle cream reviews 2015free music downloads Recent comment authors
  Subscribe  
newest oldest most voted
Notify of
mujeres sexys
Guest

Hello There. I found your blog using msn. This is a very
well written article. I will make sure to bookmark it
and come back to read more of your useful info.
Thanks for the post. I’ll definitely return.

best eye wrinkle cream reviews 2015
Guest

Thank you for another informative site. The place else could
I get that kind of info written in such a perfect approach?
I have a challenge that I am simply now working on, and I have been at the glance out for such information.

free music downloads
Guest

Fantastic beat ! I would like to apprentice while you
amend your site, how could i subscribe for a blog website?
The account aided me a acceptable deal. I had been tiny bit acquainted of this your
broadcast offered bright clear idea